干擾/敲除慢病毒(三保一)價(jià)格:5998元
過(guò)表達慢病毒價(jià)格:2800元起
服務(wù)優(yōu)勢
1、更多準現貨最快1-2周交付1ml,高滴度病毒
2、病毒穿梭載體齊全,各種標簽和啟子PEG,高速,層析等多種純化方式
3、完善的快速的售后體系,解決后顧之憂(yōu),不成功不收任何費用
4、病毒使用無(wú)憂(yōu),保證蛋白水平明顯變化
慢病毒使用說(shuō)明
準備貼壁細胞:第1天,在24孔培養板(以此為例)接種若干孔,每個(gè)孔內接種3~5×10的4次方個(gè)目的細胞,以便進(jìn)行病毒感染時(shí)細胞的融合度約為70%。
第2天,觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài),如細胞狀態(tài)較好則開(kāi)始侵染。
病毒侵染:取出-80C的儲存的病毒,在冰上融化后,瞬時(shí)離心。使用含血清、不含抗生素的培養基,根據MOI配制慢病毒稀釋液(可設置不同MOI)。根據需要添加Polybrene,添加時(shí)需要設置合適的濃度吸去原細胞培養器皿中的培養基,添加配制好的慢病毒稀釋液?;靹蚝蠓庞诙趸寂囵B箱(37°C、5%的二氧化碳)孵育過(guò)夜。
去除病毒:第3天,更換培養液。一般在24小時(shí)候內將含有慢病毒的培養液更換成正常培養液;如果侵染對細胞有明顯毒性作用而影響細胞生長(cháng)狀態(tài),可以在8-12小時(shí)更換培養液。
檢測結果:第4天,帶熒光標簽的慢病毒可通過(guò)倒置熒光顯微鏡進(jìn)行侵染效果評估;帶螢火蟲(chóng)熒光素酶標簽的病毒可通過(guò)熒光素酶實(shí)驗進(jìn)行侵染效果評估:也可通過(guò)qPCR或WB進(jìn)行侵染效果評估。